产品货号:
WE0308
中文名称:
高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒
英文名称:
eECL Western Blot Kit
产品规格:
50ml|250ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
高灵敏度化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的高灵敏增强型检测试剂盒。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下产生高强度的信号,能够检测pg级别的抗原。灵敏度高、发光信号强烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
组成 | 50mL | 250mL |
eECL-A(Luminol Enhancer) | 25mL | 125mL |
eECL-B(Peroxide) | 25mL | 125mL |
- 在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
- 避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
- 百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
- 二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
- 根据需要量,将eECL-A和eECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为化学发光检测底物工作液(一张8cm×6cm的膜大约使用1mL工作液)。
- 弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3~5分钟。
- 用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
- 在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
膜上出现棕色或黄色条带 | ||
暗室中看到强烈发光 | ||
发光信号持续时间过短 | ||
信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 | |
蛋白转移率低 | 优化转移系统 | |
高背景 | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
封闭不足 | 优化封闭程序 | |
封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 | |
冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 | |
曝光过度 | 减少曝光时间 | |
抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 | |
蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
膜未平衡 | 按照说明书处理膜 | |
胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 | |
出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) | 系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) | 一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
SDS导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
相关搜索:高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒,化学发光检测试剂盒,ECL试剂盒,eECL Western Blot Kit